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一、顯微鏡的使用方法
㈠準備工作:首先將顯微鏡的工作臺擦干凈,然后將要觀察的標本和各種器具準備好。
㈡顯微鏡的使用
⒈取用:將顯微鏡從鏡箱取出,取出時一手握鏡臂,一手托底座將其輕放在離工作臺邊緣8-10厘米處,偏左的位置。
⒉低倍鏡的使用
⑴對光:對光前,先安上合適的目鏡(一般采用10×目鏡),將10×、40×、100×物鏡按照順時針安在物鏡轉(zhuǎn)換器上,逆時針轉(zhuǎn)動轉(zhuǎn)換器使10×物鏡對準載物臺中央的通光孔。從目鏡中觀察,同時調(diào)節(jié)反光鏡或接通電源,直至視場明亮、均勻為止。
使用雙目顯微鏡對雙目鏡寬度要進行調(diào)節(jié),用推或拉的方法調(diào)節(jié)兩目鏡之間的距離,直到在兩個目鏡上雙眼同時觀察時,兩個圖形的視場正好*重合,此時鏡筒刻度盤上所示的數(shù)字,就是觀察者兩眼瞳孔之間的距離。
根據(jù)物鏡的放大倍數(shù)調(diào)節(jié)聚光鏡的高度,使用油鏡時由于放大倍數(shù)大,鏡像亮度小,需要較強的照明,需要將聚光鏡升至zui高處。
調(diào)節(jié)可變光闌(光圈)使聚光鏡的鏡口率與物鏡的鏡口率一致,才能充分發(fā)揮舞靜的分辨率,方法為:將顯微鏡調(diào)整到工作狀態(tài)后,從目鏡筒中拔出目鏡,一邊觀察(向拔出目鏡的目鏡筒里看),一邊縮小光闌,這時可看到縮小的光闌被物鏡成的像,然后逐漸調(diào)大光闌,當光闌像的邊緣與物鏡通光孔黑圈的邊緣一致時停止,這時的聚光鏡鏡口率與物鏡鏡口率就一致了。如顯微鏡可變光闌圓框上刻有表示口徑的標尺,可調(diào)至物鏡鏡口率的80%,即物鏡鏡口率為0.65,則可變光闌的標尺調(diào)至0.65×80%=0.52即可。
⑵觀察:將標本放置在載物臺上,使標本對準通光孔正中,下降鏡筒或升高載物臺,并從側(cè)面觀察,使物鏡下端和標本逐漸接近,但不能碰到蓋玻片。從目鏡觀察,用粗準焦螺旋慢慢升起鏡筒和下降載物臺直到看到標本為至,再調(diào)節(jié)細準焦螺旋至物像清晰。
⒊高倍鏡的觀察
在低倍鏡下,找到要進一步觀察的部位,移至視野中心,再上升聚光鏡、逆時針轉(zhuǎn)動物鏡轉(zhuǎn)換器換上高倍鏡。合格的顯微鏡操作距離是由低倍鏡轉(zhuǎn)換到高倍鏡時剛好合用的,一般稍為調(diào)節(jié)一下細準焦螺旋即可看到清晰的物像。
⒋油鏡的觀察
在高倍鏡下看到標本后,把需要進一步放大的部位移至視野中心。上升鏡筒或下降載物臺約1.5厘米。將物鏡轉(zhuǎn)離光軸,在蓋玻片所要觀察的部位上滴一滴香柏油,把光闌升至zui大。換上油鏡,小心調(diào)節(jié)粗準焦螺旋,使油鏡慢慢下降或慢慢上升載物臺,從側(cè)面觀察油鏡下端與標本之間的距離,當油鏡的下端開始觸及油滴時即可停止。從目鏡觀察,調(diào)節(jié)細準焦螺旋,直至看清標本物像。
觀察完畢,上升鏡筒或下降載物臺,將油鏡轉(zhuǎn)離光軸,用干的擦鏡紙輕輕地吸掉油鏡和蓋玻片上的油,再用浸濕二甲苯的擦鏡紙擦拭兩三次,zui后用干凈的擦鏡紙再擦拭兩三次。
㈢觀察后的處理工作
清潔:顯微鏡上的污物(殘物或灰塵),用擦鏡紙擦干凈,若擦不干凈可蘸少許二甲苯進行擦拭。
顯微鏡各部分的放置:擦完后,把物鏡轉(zhuǎn)離光軸,把反光鏡轉(zhuǎn)到與載物臺垂直的方向,以減少灰塵粘落上面,而后罩上鏡套,小心的放回鏡箱內(nèi),保存?zhèn)溆谩?br />二、使用顯微鏡時應(yīng)注意的事項
⒈取放時動作一定要輕,切忌震動和暴力,否則會造成光軸偏斜而影響觀察,而且光學玻璃也容易損壞。
⒉由于物鏡的螺絲口容易損傷,安裝物鏡時要特別小心,即先向左方倒轉(zhuǎn)一小段,凹凸雙方吻合后再向右方旋轉(zhuǎn),不要轉(zhuǎn)的太緊,輕輕捻到頭,再稍緊即可。
⒊鏡檢標本應(yīng)嚴格按照操作程序進行,觀察時要從低倍鏡開始,看清標本后再轉(zhuǎn)用高倍鏡、油鏡。
⒋使用油鏡時一定要在蓋玻片上滴油后才能使用。油鏡使用完后,應(yīng)立即將鏡頭、蓋玻片上的油擦干凈,否則干后不易擦去,以致?lián)p傷鏡頭和標本。但應(yīng)注意二甲苯用量不可過多,否則,物鏡中的樹膠溶解,透鏡歪斜甚至脫落,蓋玻片移動甚至連同標本一起融掉。
⒌使用時不可用手摸光學玻璃部分,如需擦拭應(yīng)嚴格按照光學部件擦拭辦法。
⒍使用的蓋玻片和載玻片不能過厚或過薄。標準的蓋玻片為0.17±0.02毫米,載玻片為1.1±0.04毫米。過厚或過薄將會影響顯微鏡成像及觀察。
三、生物顯微鏡的擦拭和保養(yǎng)
㈠擦拭
⒈光學部分的擦拭
順序:吸耳球吹――毛筆、刷子和羽毛輕刷――擦鏡紙輕擦——擦鏡紙蘸二甲苯輕擦。
鏡頭表面發(fā)霉和發(fā)霧可用擦鏡紙蘸少量酒精乙醚混合液(3:7)輕擦。內(nèi)表面發(fā)霉和發(fā)霧,一般無法清除,所以嚴防發(fā)生。
⒉機械部分的擦拭
用干凈的軟布擦拭,或用擦鏡紙蘸二甲苯輕擦,不得用酒精和乙醚,因為這些試劑會侵蝕油漆,容易把油漆擦掉。
㈡保養(yǎng)
防潮、防塵、防腐蝕、放熱
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